離心就是利用離心機(jī)轉(zhuǎn)子高速旋轉(zhuǎn)產(chǎn)生的強(qiáng)大的離心力，加快液體中顆粒的沉降速度，把樣品中不同沉降系數(shù)和浮力密度的物質(zhì)分離開(kāi)。
當(dāng)含有細(xì)小顆粒的懸浮液靜置不動(dòng)時(shí)，由于重力場(chǎng)的作用使得懸浮的顆粒逐漸下沉。粒子越重，下沉越快，反之密度比液體小的粒子就會(huì)上浮。微粒在重力場(chǎng)下移動(dòng)的速度與微粒的大小、形態(tài)和密度有關(guān)，并且又與重力場(chǎng)的強(qiáng)度及液體的粘度有關(guān)。象紅血球大小的顆粒，直徑為數(shù)微米，就可以在通常重力作用下觀察到它們的沉降過(guò)程。
下面以血清為例，講述離心機(jī)的應(yīng)用。
血液凝固的本質(zhì)是血漿內(nèi)的可溶性纖維蛋白原轉(zhuǎn)變?yōu)椴蝗芙獾睦w維蛋白.纖維蛋白呈細(xì)絲狀,互相交織成網(wǎng)，網(wǎng)羅大量血細(xì)胞,形成凝膠狀的血塊。血凝后30分鐘~1小時(shí),血凝塊中的血小板收縮蛋白收縮,使血塊回縮變硬,擠出清澈的液體,稱(chēng)為血清.血清與血漿的區(qū)別,在于血清缺乏纖維蛋白原和參與血凝的凝血因子,但又增添了凝血過(guò)程中由血小板釋放的少量物質(zhì)。
一般情況:室溫(37度)靜置半小時(shí)以上,打開(kāi)離心機(jī)，3500-4000rpm離心5-10分鐘。分離得到血清。如果測(cè)酶等易降解的指標(biāo),按需要放4度靜置半小時(shí)以上。(放置37度一段時(shí)間的目的是讓血液凝固,析出血清,因?yàn)檠耗毯?纖維蛋白收縮,血清就能析出.)
注意事項(xiàng)
1離心速度過(guò)大,易造成溶血
2動(dòng)物取血,盡量不要粘到毛什么的,易溶血.
小竅門(mén):血取出后,不要將容器直立,平放或傾斜,這樣可擴(kuò)大血清的析出面積,利于血清析出。
綜上所述，關(guān)鍵的問(wèn)題是采血要采好，室溫靜置時(shí)間要做好把握，然后再用專(zhuān)用的離心機(jī)，進(jìn)行血清分離
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